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复式8加1双色球中奖:論文解讀--貝萊斯芽孢桿菌K2對雜交石斑魚生長、免疫和抵抗哈維氏弧菌感染的影響

出處:公眾號水生動物健康評估 作者:陸枝 水產養殖網 2019-11-06 11:06:00

今天與大家分享一篇來自Fish and Shellfish Immunology的文章:貝萊斯芽孢桿菌K2對雜交石斑魚生長、免疫和抵抗哈維氏弧菌感染的影響。文章引用信息如下:
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細菌性疾病的爆發導致水產養殖人員和企業蒙受巨大的經濟損失,現已成為魚類養殖的主要威脅。在過去幾十年里,抗生素和消毒劑使用是控制魚類細菌性疾病的主要手段。然而,抗生素濫用及殘留對人類健康造成了嚴重的威脅,急需替代產品來控制魚類細菌性疾病。

近來,益生菌喂養被認為是一種很有前景的控制魚類疾病的策略,它主要通過酶促進消化、抑制病原微生物、促進生長因子和增強宿主免疫來促進宿主健康。一些研究表明,從魚的腸道分離出的益生菌具有抑制病原體生長的能力。

本研究從健康石斑魚腸道中分離到一株芽孢桿菌K2,并通過基因序列比對和系統分析,確定該菌株為Bacillus velezensis。體外抗菌試驗表明,該菌株對幾種魚類致病菌具有明顯的抗菌活性。此外,本研究評價了B. velezensis K2作為飼料益生菌對雜交石斑魚生長、免疫力和抗病性的潛在作用。

菌株分離及抗菌實驗
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抗菌試驗發現有7株菌株對哈維氏弧菌有拮抗作用,其中一株菌株被命名為K2,表現出最強的抗菌活性。

安全評估
  溶血實驗發現K2不具溶血活性,以不同劑量注射到魚體體內也未造成魚體死亡。
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生長性能

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對照組(基礎日糧)和試驗組(添加1×107CFU/g K2菌株)投喂石斑魚。每周測定體長、體重和胴體重。結果表明在體長、體重和胴體重方面2組均無顯著差異。

血清酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)和C3活性

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飼料中添加K2菌株的魚的ACP活性在第一周顯著高于對照組(P<0.05圖5A)。在第二周極顯著高于對照組(P<0.01圖5A)。飼喂7、14、21和28天后,堿性磷酸酶(Fig. 5B)和 C3 (Fig. 5C)活性沒有表現出顯著差異。

添加B. velezensis K2后免疫相關基因的表達

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采用實時定量PCR方法檢測IL-8(A)、TLR-5(B)、CC趨化因子1(C)、溶菌酶(D)、piscidin(E)、IgM(F)、MyD88(G)和TLR-3(H)的相對表達,結果表明:
飼喂第一周后,IL-8水平顯著升高(P<0.05,圖6A),而第二周和第四周顯著性下降(P<0.01)。
CC趨化因子1基因的表達在第14天出現了極低的表達(P<0.01,圖6c),IL-8和CC趨化因子1的表達都受到抑制(P<0.01),在第14天和第28天下調,特別是在第28天和第14天有顯著差異(分別為P<0.05和0.01,圖6A、C)。
在攝食28天時,用B. velezensis K2處理的魚與對照魚TLR5(圖6B)mRNA表達呈下降趨勢。
溶菌酶基因的表達呈上升趨勢。喂養1~3周,喂養1周和2周后 lysozyme差異顯著(P<0.05,圖6d)。
piscidin、IgM和MyD88 mRNA的表達也是相同的。在第四周時瞬時下調,包括piscidin、IgM和MyD 88基因的顯著改變(P<0.05,圖6e,F,G)。相反,TLR 3在益生菌處理的魚類中的mRNA表達下調。攝食28天與對照組比較,差異有顯著性意義(P<0.05,圖6h),第28天顯著降低(P<0.05,P<0.05)。

抗感染分析

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本研究通過連續1周的時間記錄魚類感染哈維氏弧菌死亡情況,評價芽孢桿菌K2對石斑魚的?;ぷ饔?。如圖7所示。石斑魚飼喂常規飼料和含有芽孢桿菌K2的飼料,存活率分別為25%和55%,統計分析顯示菌株K2顯著提高了魚的生存率。

總之,本研究確定了(B.velezensis)作為一種潛在的益生菌在水產養殖中的應用效果。證明用含1×107 cfu/g K2的飼料喂養石斑魚,處理28d可提高石斑魚對哈維氏弧菌的抗性,但對其生長性能無明顯改善。K2可誘導某些先天細胞免疫和體液免疫基因的上調,從而增強對哈維氏弧菌的抵抗力。
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