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彩票复式中奖了怎么算:論文解讀--羅湖病毒可從親魚傳播至其生殖器官和受精卵

出處:公眾號水生動物健康評估 作者:小破同學 水產養殖網 2019-11-06 11:21:00

今天為大家帶來一篇《羅湖病毒可從親魚傳播至其生殖器官和受精卵》的文獻解讀,引用信息如下:
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小編前期就曾報道過羅非魚湖病毒(TiLV)是一種新發現的羅非魚病毒,目前在世界上有14個國家的養殖或野生羅非魚種群中都有羅湖病毒感染的記錄,TiLV爆發后可導致20-90%的死亡率。報道發現在一些羅非魚孵化場,受精卵和羅非魚的早期發育階段中可以檢測到羅湖病毒,表明該病毒可能垂直傳播。然而,尚不清楚TiLV是否能夠從受感染的親魚群傳播到它們的生殖器官和后代。這篇文章研究旨在探討實驗感染的親魚能否將病毒傳給其生殖器官、卵子、精子和受精卵。結果如下:

一、PCR檢測羅湖病毒感染親魚和體外受精卵

本研究采用PCR方法檢測了羅湖病毒感染3個羅非魚家系后親魚的組織及其體外受精卵。雌性親魚取肝臟、血液、卵巢和未受精卵,雄性親魚取肝臟、血液和睪丸。分別于受精后3、12、64h采集人工受精卵。以同樣的方式處理來自兩個對照家系的相應樣本。表1中總結的結果表明,在實驗受到攻毒的魚類中存在TiLV的全身感染。用PCR方法檢測了來自受試家系的全部樣本,包括雄性和雌性親魚的肝臟、血液、生殖器官和未受精卵都呈現TiLV陽性結果。三個感染家系在受精后3、12和64小時后采集的受精卵也呈陽性,但1家系在3和64小時采集的樣本除外。來自兩個對照家系(4-5)的樣本TiLV均為陰性(表1)。
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二、原位雜交揭示TiLV在魚類組織中的定位

采用原位雜交(ISH)技術,進一步研究TiLV在感染親魚肝臟、生殖器官和受精卵中的存在,并與未感染TiLV的魚類家系進行對照。結果如下:
(1)肝臟: 使用TiLV特異性探針,發現從6只感染的親魚(3只雄性和3只雌性)采集的肝臟樣本顯示出強烈的ISH反應信號。圖2顯示了感染親魚ISH結果的代表性照片。與H&E染色切片相比,ISH強陽性信號定位于肝臟血管周圍區域(箭頭,圖2c)。在高倍鏡下,感染肝細胞的細胞核和細胞質中均可見陽性信號(圖2f)。這些肝細胞也顯示出退化的跡象,并在其細胞質中積聚脂褐素(棕色)(圖2d),而合胞性肝炎的跡象則沒有清楚的觀察到。
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(2)卵巢: 通過H&E染色,觀察到雌性卵巢中卵母細胞的不同發育階段(圖3)。感染卵巢的結締組織中可見炎性淋巴細胞、含黑色素的巨噬細胞浸潤(圖3A、D)。ISH結果與PCR結果一致,發現感染雌性親魚的卵巢在卵母細胞不同發育階段周圍的結締組織中顯示出強烈的TiLV陽性信號(圖3C,F)。退化卵母細胞也被稱為閉鎖卵母細胞似乎在其膜上和卵母細胞內具有更強的反應性(圖3F)。卵母細胞膜的某些區域也發現TiLV陽性(箭頭,圖3C,F)。
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(3)睪丸
與卵巢相似,用TiLV特異性探針在受感染的雄性羅非魚親魚中所有睪丸樣本中檢測出陽性信號。陽性信號主要出現在結締組織和一些類似淋巴細胞的細胞中,特別是在血管周圍的組織區域(箭頭,圖4C,E和G)。精母細胞、精子細胞和精子區均未檢測到陽性信號。
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(4)受精卵
結果40-50%的受精卵細胞主要是卵子內檢測到的TiLV陽性反應(圖5)。
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三、細胞系培養揭示病毒活性

該研究還采用E11細胞系傳代培養法,對本次實驗中的TiLV的活力和感染狀況進行了評價。從感染TiLV的親魚和對照組親魚中采集的血清、肝臟、卵巢、睪丸、受精卵和未受精卵并制備濾液。結果發現E11細胞系中TiLV感染的斑塊形成和細胞收縮的典型細胞病變效應(CPE)在接種感染魚的血清、肝臟、卵巢、睪丸和未受精卵的濾液后的地2-5天清晰可見。圖6B清晰可見接種感染TiLV的親魚卵巢上清液后E11細胞中的CPE現象。
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四、總結

綜上所述,本研究表明羅非魚親魚體內感染了羅非魚病毒后,病毒可以通過血液循環系統進入雌雄魚的生殖器官并感染卵子、精子和受精卵。因此,為了繁育不含TiLV的種苗,我們應該避免使用感染TiLV的親魚進行育種。

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